摘要】:本课题将围绕角膜基质脱细胞的方法,例如:络合剂加盐-阴离子表面活性剂法、胰酶联合EDTA交联液法等方法进行延伸研究,从而发现一些能够快速且温和地去除角膜上皮层和免疫原细胞成分的方法。
通过比较角膜基质胶原结构的破坏程度,胶原纤维排列是否整齐,孔隙均匀规则,有无细胞残留,板层结构保留完整程度,来验证有无得到完好的脱细胞角膜基质。
【关键词】:角膜;角膜基质;脱细胞1.脱细胞角膜基质脱细胞角膜基质是近年来组织工程角膜的研究热点,其保持了天然角膜的结构和力学性能,并且含有人工合成的支架所不具有的生长因子,为细胞生长提供了良好的生长环境,并且去除了组织中能引起免疫排斥反应的细胞成分(范先群,2008)。
近年来,不断有学者应用不同的脱细胞方法对异种源角膜进行处理,从而制备脱细胞角膜基质,并取得了一系列研究成果。
Wu等(2009)利用磷脂酶 A2 制备猪脱细胞角膜基质支架,制备的支架生物相容性良好、无抗原性,且具有较好的力学性能和透明度,之后进行兔角膜移植,术后12个月仍能保持稳定。
Pang等(2010)利用0.5% SDS备脱细胞猪角膜基质支架,获得的支架具有良好的生物相容性和透明度,且保持了良好的机械性能,并用该载体支架体外重建了组织工程角膜前板层,之后进行兔角膜移植,1个月内能保持稳定,并表现出组织修复能力。
Gonzalez-Andrades 等(2011)比较了Na Cl和SDS 两种脱细胞方法,并用这两种方法制备的支架体外重建了组织工程角膜基质,发现前者制备的支架更利于人角膜基质细胞的生长。
制备脱细胞猪角膜基质的方法很多,但不同处理方法制备的支架之间存在差异,其支架孔径和细胞外基质(ECM)结构有所不同。
所以,制备脱细胞猪角膜基质支架的关键在于建立一种有效的脱细胞方法(Xu et al,2008)。
2. 角膜基质脱细胞方法的研究进展随着近年来组织工程技术的兴起,推动了角膜组织工程体外重建的研究,其中载体支架的研究是组织工程领域的主要内容,也是组织工程角膜体外重建的基本要素之一。
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