文献综述
文 献 综 述1.1 酿酒酵母启动子工程启动子是控制蛋白质表达定量和时间调控的基本转录调控元件,启动子水平的转录调控是调节代谢通量的最直接有效的方法1,在调控遗传回路和代谢途径的基因表达中发挥着重要作用,被广泛应用于生物传感器和代谢工程。
目前,启动子工程的研究方法主要包括非保守序列随机化、易错PCR、合成型启动子工程、理性设计转录因子结合位点(Transcription factor-binding sites,TFBSs)、启动子与RBS组合等。
然而,酵母自身的启动子存在着一些局限性,阻碍了其在代谢工程中的应用1,2。
这些局限性包括特征良好的启动子数量不足、动态范围差、与内源性调控的正交性不足。
酿酒酵母启动子具有多个必不可少的元素,用于基因的精确转录调控,包括核心启动子区域,上游激活序列(UAS),上游阻遏序列(URS)和不利于核小体的序列。
这些元素中的每一个在调节启动子活性中都起着至关重要的作用,因此,重要的是了解这些元素的功能和组合调节机制,以预测其功能。
为了获得启动子调控机制的全面了解,已有几个工具被开发出来,如YEASTRACT(酵母转录调节因子和共识跟踪的搜索)和SCPD(酿酒酵母启动子数据库)。
上游激活序列(UAS)通常在酿酒酵母中位于核心启动子的上游数百个碱基对处,并充当特定转录激活子的结合位点。
UAS是启动子的关键区域,可增强基因表达3。
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