具有大孔径硼酸修饰的核/壳结构的磁性微球用于内毒素去除的研究 开题报告
研究目的
内毒素（endotoxin），又称脂多糖（lipopolysaccharide, LPS），是革兰氏阴性菌细胞壁外膜的主要成分之一，其毒性高，危害大。哺乳动物静脉注射1 ng/mL内毒素足以引发热原反应和休克。由于细菌即使在贫营养化的介质中也能生长，因此，内毒素几乎无处不在。在生物技术产业，革兰氏阴性菌被广泛用于生产重组DNA产品（如蛋白质和多肽），这些产品经常被内毒素污染 。因此，尽可能去除各种来源的内毒素对于生物研究、制药工业和生命健康具有重要意义。
研究内容
内毒素的化学成分是脂多糖，它由三部分组成：脂质A、核心多糖和O-抗原区 。而顺式二羟基类化合物(CDB)又是糖类的重要组成部分。但是,在生物样品分析中,它们的含量很低,且基质干扰严重,直接分析面临着挑战。因此,需要发展一种简单有效的富集方法。其中硼亲和材料对于CDB可以实现可逆结合以及专一性识别,从而在顺式二羟基分子的分离富集中发挥着举足轻重的作用。因此，本次毕设将会运用硼亲和色谱的原理，利用具有大孔径硼酸修饰的核/壳磁性微球来分离去除内毒素。
研究手段
内毒素的化学结构决定了它是两亲分子，在水溶液中容易形成超分子聚集体，如层状、立方和六边形的胶束和囊泡 。内毒素聚集体的尺寸和分子量取决于内毒素的来源、浓度、测量方法、温度等因素，其水力半径范围为9–171 nm, 摩尔质量范围为2.5–7000 kDa [。此外，内毒素热稳定性高，常规消毒不能破坏内毒素 。通过合成硼酸修饰的磁性材料，利用硼亲和原理，硼酸能够在碱性环境下与顺式二羟基发生反应，生成环酯；该结合是可逆的，在酸性条件下可以解析下来，这样就可以很好实现对于内毒素的分离去除。
对于内毒素的检测，我们将采用鲎试剂法。鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下，细菌内毒素激活C因子，引起一系列酶促反应，激活凝固酶原形成凝固酶，凝固酶将分解人工合成的显色基质，使其分解成多肽和黄色的对硝基苯胺。在一定的时间内，其生成量与内毒素浓度成正比，据此可以测定内毒素浓度。
主要成果形式
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