开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
1 本课题的背景
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,金葡菌)是一种典型的食源性和医源性致病菌[1]。金葡菌污染食品导致食物中毒已经是一个世界性卫生问题[2]。据美国疾病控制中心报告,在美国由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒数量仅次于大肠埃希菌,居第2位,占细菌性食物中毒的33%,而在加拿大则占45%,在某些欧洲国家如匈牙利、芬兰等则占食物中毒事件的50%以上。在我国,每年由金黄色葡萄球菌引起的食物中毒事件也是屡见不鲜[3]。金黄色葡萄球菌对食品的污染主要有2个途径:一是食品原料本身带菌;二是食品加工过程中金黄色葡萄球菌的污染[4]。
抗生素的发现是20世纪医学史上最伟大的革命,但随着广谱抗生素的广泛使用和滥用,催生并进一步富集了“超级细菌”,例如 MRSA(Methicillin-resistant Staphylococcus aureus)是具有甲氧西林耐药性的金黄色葡萄球菌,由于其耐药性致使用药困难,患者病死率极高。因此,在倡导合理使用抗生素的同时,亟待研发新型抗细菌感染药物。抗生素是通过直接抑制病原菌的生长或直接杀死病原菌来达到治疗效果,从而给予了细菌强大的选择压力。而当前许多研究开始着手通过降低细菌的毒力来降低致病性,从而达到预防和治疗细菌感染疾病的目的[5]。
金黄色葡萄球菌通过产生各式各样的毒力因子来实现对宿主细胞的黏附、侵染和散播, 并可通过形成菌膜以应对宿主免疫系统或抗生素的杀伤作用[5]。目前有研究表明金黄色葡萄球菌产生的葡萄球菌黄素是决定金黄色葡萄球菌致病能力的一个关键因子[6],而金黄色葡萄球菌具有较强的菌膜形成能力,生长在成熟菌膜内部的细菌抗性更强,危害更严重,也更难清除[5]。石文琪等《食源性金黄色葡萄球菌的生物被膜形成能力及其基质组成研究》中也发现了菌株的色素产量可能与生物被膜的形成能力之间有关[7]。
2 拟研究的问题
提出一个假设,葡萄球菌黄素合成能力的高低与菌膜形成能力的高低正相关,也就是说合成葡萄球菌黄素能力弱的金黄色葡萄球菌形成菌膜能力也弱。为了验证这一假设,本课题将从大量的金黄色葡萄球菌分离株中,筛选形成葡萄球菌黄素能力高低差异的菌株,进行菌膜形成能力的测定,建立葡萄球菌黄素与菌膜形成之间的相关性模型。
3 研究方法
3.1金黄色葡萄球菌分离株葡萄球菌黄素形成能力初筛
3.1.1探索判别金黄色葡萄球菌菌落颜色深浅程度的方法
由于菌落颜色受菌落密集程度、培养时间、温度、培养基颜色等因素的影响,故除保持培养条件、时间等一致外,选择单菌落作为颜色深浅程度判别依据。
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