- 研究背景及方向
随着癌症频率的增加,抗癌治剂的种类也越来越多,例如:代谢拮抗剂、植物生物碱、拓扑异构酶抑制剂、烷基化试剂、抗癌抗生素、激素等。癌细胞内蛋白质合成速率较快,所以从蛋白抑制剂方向出发,可以抑制肿瘤的增殖。本实验主要研究抗癌多肽药物诺西肽作用于肝癌细胞的靶蛋白,如果成功分离目标靶蛋白则可利用诺西肽来治疗肝癌。
实验首先利用Micheal Adduct反应将诺西肽与亲和柱材连接,利用红外和HPLC检测亲和柱材是否连接成功,并计算偶联率。并且利用系列亲和色谱筛选肝癌细胞株的细胞裂解液,初步获得了诺西肽体外抗肝癌细胞的作用靶蛋白。
二、课题研究的主要过程
1.亲和柱材的制备及柱参数的考察
a)亲和柱材的制备
b)偶联率的考察
2.细胞培养
3.细胞总蛋白的提取
4.系列亲和色谱反应
5. 分离样品的SDS-PAGE鉴定
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