高质量的InP量子点的合成及细胞成像文献综述

 2023-02-15 18:49:48

一、选题背景生物科学的发展与新方法的开发及新技术的应用密切相关,在化学发光物质及生物荧光标记物和荧光显微镜的出现后,人们对于细胞内亚层次的结构、细胞内分子的活动、信号转导及蛋白质之间的相互作用,有了更深刻更详细的了解,对生命科学的意义有了更深层次的认识。

但是如何不受各种干扰信号的影响而发挥光学标记物的作用及如何更有效的延长光学标记分子的荧光特性,一直是广大光学标志物研究者致力开发的目标。

量子点作为一种新型的纳米荧光材料,具有许多传统的有机荧光染料所无法比拟的优异光学性质。

不同粒径的量子点可以用单一波长的光激发出不同的颜色,发射光谱也不易重叠;且光稳定性好,抗光漂白能力强量子点由于尺寸特点及光学特点使得它非常适合于在生物成像中作为荧光标记物,随着纳米技术的飞速发展,量子点作为荧光标记物已被广泛应用到了多种生物领域,包括结合细胞内荧光标记成像、荧光共振能量转移等技术检测靶分子、蛋白相互作用等,其中荧光标记成像技术应用领域的发展最引人注目在生命科学领域显示出广阔的应用前景。

二、拟研究和解决的问题:本实验用下述合成方法,综合考虑需要控制的因素,如反应温度、反应时间、配体等等,合成InP QDs,并利用下述细胞成像方法,观察InP量子点在细胞内成像效果。

三、研究手段和方法通过查阅相关文献,了解有关InP量子点的制备,通过XRD、电镜等表征技术观察合成质量,并通过查阅相关量子点在细胞成像领域的应用,设计细胞实验,并使其成功在细胞内成像。

1、InP的合成:通常使用热注射的方法来制备InP QDs,其反应机理如下:①(DEA)3P进入体系中快速地与油胺 (Oleylamine,OAm)等胺类发生转胺反应,生成油胺膦的活性中间体(由于副产物二乙胺的沸点为55℃,因此该反应极易进行);②生成的油胺膦活性中间体与卤化铟形成加合物中间体;③过量的油胺膦继续进攻加合物中间体的氮位点,削弱N-P键直至脱下一个乙二胺和一个卤素离子;④过量的油胺膦反复进行③过程,直至形成InP单体;⑤InP单体到达一定浓度时成核形成InP QDs,InP单体浓度快速降低,进入生长过程。

2、细胞培养过程:(1)细胞复苏①细胞房、超净台经紫外灯照射灭菌 30 min 后,从液氮罐内拿出细胞冻存管,迅速放入 37C 水浴中摇晃至冻存的细胞悬液融化,注意管口不要碰到水面,避免污染细胞。

②将细胞悬液吸取至无菌离心管中,加入 1 ml 培养基,1000 rpm/5 min;弃上清,加 入 2 ml 完全培养基,移液枪伸入液面以下,将离心得到的紧实细胞团吹打均匀,使其均匀分散在培养基中,注意尽量避免气泡产生。

③在新的无菌细胞培养瓶中加入 3 ml 完全培养基,再将离心管中的细胞悬液转入新的细胞培养瓶,轻柔水平晃动使细胞分散均匀。

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