开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
一、研究背景
肿节风是金栗兰科植物草珊瑚的干燥全株，具有祛风除湿、活血散瘀、清热解毒的功能。用于治疗肢体麻木，肺炎，急性肠胃炎，风湿痹痛等症。肿节风的主要化学成分为多糖、挥发油、酯类、黄酮、氰甙、香豆素、内酯等，而多糖被认为是其发挥多种生物活性的重要物质基础。研究表明肿节风多糖中的迷迭香酸-4-O-beta;-D-吡喃葡萄糖苷能刺激小鼠树突状细胞分化，调整CD4 /CD8 T细胞平衡，提高NK细胞活性，从而激活机体的免疫反应；3，5-二羟基香豆素-7- O-alpha;-L-吡喃鼠李糖苷具有消炎镇痛的作用[1]。实验室前期采用水提醇沉法、离子交换树脂精制、分子筛凝胶色谱分离等获得了肿节风多糖SGP-1和SGP-2。SGP-1是由葡萄糖、半乳糖和甘露糖构成的中性多糖,相对分子质量为4500; SGP-2是由葡萄糖、半乳糖、甘露糖、阿拉伯糖和半乳糖醛酸构成的酸性多糖，相对分子质量为1.88 x 106。SGP-1和SGP-2均具有体外抗氧化和抗肿瘤活性,但SGP-2的活性远高于SGP-1[2]。有文献报道肿节风酸性多糖SGP-2可以通过NF-кB等途径抑制人骨肉瘤细胞的增殖和迁移；能降低 2 型糖尿病小鼠的血糖和血脂[3]。
在肿节风有效成分检测方法方面，主要方法有经典的紫外可见分光光度法、高效液相色谱法、高效毛细管电泳法、高效液相指纹图谱等。虽然目前肿节风有效成分分析及检测方法相关研究取得了一定进展，但仍然存在很大不足。国内对肿节风化学成分的研究主要集中在对其黄酮类、香豆素类及挥发油类，肿节风多糖相关研究相对较少。
多糖与生命有着密切联系，其与蛋白质、核酸统称为生命有机体的三大基本物质，多糖组成细胞和整个生物体的结构并作为信号分子发挥重要作用。目前，在多糖研究中仍有诸多问题，例如分子量分布广，结构可控性差，且支链结构分布不均一，构效关系不明确。但是多糖的支链结构往往对其活性具有重要作用。研究显示，多糖在与蛋白受体结合时，仅是多糖分子中的寡糖片段与受体相结合，与酶作用过程相似，多糖分子中也存在一种或多种寡糖片段“活性中心”。因此将多糖降解为寡糖，从寡糖水平研究多糖的活性中心，为我们突破多糖药理机理与结构基础的瓶颈提供了可能。
酶降解法是多糖降解为寡糖的有效手段之一，选择合适的降解酶对糖进行降解，既可以避免传统化学降解法和物理降解法的弊端，又可以进行选择性地酶解切断特定糖苷键，从而对多糖专一降解, 制备得到特定聚合度的寡糖，同时也能最大程度保护反应底物的活性基团不受到破坏。但是部分酶难以获得，实验成本较高，故寻求能经济高效降解多糖的方法成为亟待解决的问题。
人类肠道微生物菌群是人体消化系统的重要组成部分，参与日常饮食中大量营养素的降解，而碳水化合物是肠道微生物的主要能量和养分来源。拟杆菌是人类肠道微生物菌群重要组成部分，能够编码大量的碳水化合物酶，在短时间内迅速调整碳水化合物利用策略，以强大的多糖利用能力适应我们的杂食性饮食，它们对宿主的肠道稳态至关重要。目前对拟杆菌降解多糖进行了广泛研究，研究表明拟杆菌，其基因组的20%与各种多糖的运输，分解以及调控有关，具有多种不同的多糖利用位点(PULs) [4]。每个PUL编码肠道菌降解特定类型碳水化合物相关的表面聚糖结合蛋白（SGBP），SusCH/SusDH转运蛋白，周质和表面碳水化合物酶以及调节蛋白。拟杆菌能够切割许多植物聚糖中存在的人体不易消化的糖苷键从而降解多糖甚至是可以降解结构最为复杂的果胶多糖[5]。
基于以上研究背景，本课题拟以拟杆菌中的优势菌卵形拟杆菌为工具，对SGP-2多糖进行生物降解。经分离纯化其降解产物，并对其进行结构解析，为肿节风多糖的构效关系研究提供基础。
参考文献
[1]He R R，Yao X S，Li H，et al． The anti-stress effects of Sarcandra glabra extract on restraint-evoked immunocompromise［J］． Biol Pharm Bull，2009，32( 2) :247-252．
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