开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)
- 本课题研究的背景
生物膜是一种附着于细菌体表或界面由细菌群体和包裹菌体的水合性基质组成的聚合体,生物膜成熟后可以释放游离菌体。当细菌受到各种极端环境,如营养物质缺乏或过剩、温度过高或过低、p H值不适、离子浓度过高和抗生素等,大量的细菌为对抗不利的外界环境,通过自身合成的水合多聚物黏附在介质表面,以固着的方式生长形成生物膜。与普通游离细菌相比,生物膜细菌和生物膜释放细菌具有较强的抗逆性。生物膜与常见的浮游状态微生物有着本质的不同,形成生物膜后的菌株对环境抗性显著增强,不易清理,危害严重,是造成能源浪费、生产事故及人体病变的重要原因。由于生物膜细菌在生理、代谢、对底物的降解或利用和对环境的抵抗能力等方面具有独特的性质,生物膜的研究近年来备受重视。
荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)是一种好氧或兼性厌氧的革兰氏阴性菌,无菌毛,有数根极端鞭毛,广泛存在于水生环境和食品中,是牛奶、肉制品、
水产品等富含蛋白和脂类食品中重要嗜冷腐败菌。研究表明,荧光假单胞菌分泌的蛋白酶和酯酶等代谢产物难以用瞬时高温灭活,导致冷藏食品的风味等理化性质变
化。在食品环境中假单胞菌还常在生产设备表面形成生物膜,生物被膜成为假单胞菌的寄所,被膜菌对食品加工过程中各种环境压力(低温、酸、盐、消毒剂)的抵
抗力都有所提高。因此,致腐被膜菌是一种生产加工中生物危害的潜在污染源,是传播食源性疾病的主要隐患。
本工作以食品致腐荧光假单胞菌的生物膜为研究对象,对其在不同环境下生物膜抗逆性进行研究,为食品加工生产过程应对荧光假单胞菌相关研究奠定基础。
- 拟研究或解决的问题
- 研究不同pH条件对荧光假单胞菌生物膜形成的影响
- 研究不同温度条件对荧光假单胞菌生物膜形成的影响
- 研究不同盐浓度条件对荧光假单胞菌生物膜形成的影响
- 研究不同过氧化氢浓度条件对荧光假单胞菌生物膜形成的影响
- 研究不同铜离子浓度对荧光假单胞菌生物膜形成的影响
- 研究手段
1.载体处理
取不锈钢网布(300目,规格10times;10mm) 先在95%乙醇中浸泡30min,然后再清水冲洗数次以除去残留乙醇。
- 研究不同pH条件对荧光假单胞菌生物膜形成的影响
在五个50mL锥形瓶中分别放置10mL,pH分别为3、5、7、9、11的LB培养基和两个经1处理后的不锈钢网布,灭菌后向其中按2%接种活化好的荧光假单胞菌,28°C恒温静置培养24h。
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