开题报告内容：（包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述，不少于2000字）
研究问题：本实验采用RT-PCR的方法从人肝癌细胞HepG2中获取hTfR(CD71)的基因，构建原核表达载体pET32a-TfR，并用此系统表达目的蛋白。
研究手段：
1转蛋白受体原核表达载体的构建：经RT-PCR扩增胞外区基因片段，并将其克隆到T载体上，经质粒PCR、双酶切及测序鉴定后，再将其亚克隆入原核表达载体pET32a中，构建重组质粒pET32a-TfR。
2转铁蛋白受体在原核系统中的表达研究：将构建的原核重组质粒pET32a-TfR转入原核表达宿主菌Transetta(DE3)，IPTG诱导蛋白表达，细胞破碎后将包涵体蛋白行镍柱上复性，咪唑洗脱收集蛋白。
人转铁蛋白受体（hTfR)胞外区原核表达载体的构建及其表达纯化
0944409 彭政鑫
【摘要】铁是人体必需的营养元素,在氧化还原作用中,许多蛋白质需要铁离子作为辅助因子，组织细胞摄取铁是依靠细胞表面表达的转铁蛋白受体与转铁蛋白的特异性结合完成的。Fe3 与转铁蛋白结合后,含铁转铁蛋白与细胞膜上的转铁蛋白受体结合,通过受体介导的跨胞转运作用进入细胞。目前已发现有两种转铁蛋白受体:TfR1和TfR2。有研究表明TfR1在增殖的细胞和多种肿瘤细胞以及血脑屏障中表达水平较高,而TfR2主要在肝脏中高水平表达。血脑屏障阻止外源性物质进入大脑，同时也给药物脑部靶向造成了困难。而脑毛细血管内皮细胞高表达TfR1，应用TfR1 单克隆抗体可实现治疗药物跨血脑屏障的传递。本实验采用RT-PCR的方法从人肝癌细胞HepG2中获取hTfR(CD71)的基因，构建原核表达载体pET32a-TfR，并用此系统表达目的蛋白。
