正交实验结合超高校液相色谱优选五味温通除麻痹胶囊醇提工艺文献综述

立题依据（课题研究的目的与意义及国内外研究现状）：

关节炎泛指发生在人体关节及其周围组织的炎性疾病，可分为数十种。我国的关节炎患者有1亿以上，且人数在不断增加。临床表现为关节的红、肿、热、痛、功能障碍及关节畸形，严重者导致关节残疾、影响患者生活质量。1.疼痛 是关节炎最主要的表现。2.肿胀肿胀是关节炎症的常见表现，与关节疼痛的程度不一定相关。3.功能障碍 关节疼痛及炎症引起的关节周围组织水肿，导致关节活动受限。慢性关节炎患者由于长期关节活动受限，可能导致永久性关节功能丧失。4.体征 不同类型的关节炎体征也不同，可出现红斑、畸形、软组织肿胀、关节红肿、渗液、骨性肿胀、骨擦音、压痛、肌萎缩或肌无力、关节活动范围受限及神经根受压等体征。

五味温通除痹胶囊是安徽中医药大学第一附属医院风湿科刘健教授根据多年临床经验制成的验方。处方由淫羊藿，桂枝，黄芩，茯苓，片姜黄等五味中药制成，具有温阳通脉，散寒止痛的功效，主要治疗类风湿性关节炎，强直性脊柱炎，骨关节炎，寒湿痹阻型所致的关节疼痛，畏寒怕冷等病症。正交试验设计是研究多因素多水平的设计方法，是一种高效率、快速、经济的实验设计方法，用于复方制剂提取工艺的研究时结合UPLC[4]，既保留了因素设计整体考虑、综合比较的优点，又避免了全面试验、工作量大的弊病[5]，同时准确、高效地测定出复方制剂中有效成分的含量。

为了优化其制备工艺，提高其临床疗效，本课题采用正交试验法，通过对醇提技术影响较大的因素如提取次数，提取时间，醇浓度等因素进行考察，筛选最佳提取工艺，用以建立五味温通醇提工艺的最佳工艺参数，为进一步开发利用该复方提供参考。

课题研究内容：

本课题采用正交试验法L9(3⁴)，对溶剂量、提取时间、提取次数3个因素进行考察,以黄芩苷、淫羊藿苷的含量和浸膏得率为综合评分指标，用综合加权评分法处理数据，，以优选出五味温通除痹胶囊的最佳醇提工艺。由于淫羊藿是方中的君药，故以淫羊藿苷提取率，浸膏得率为评价指标进行综合评定，优选出该制剂的最佳醇提工艺，为优化其制备工艺提供实验依据。

课题研究的条件（材料、主要实验仪器设备等）：

材料：淫羊藿，黄芩，茯苓，桂枝，片姜黄等药材；黄芩苷对照品、淫羊藿苷对照品；甲醇、乙腈为色谱醇，0.5%磷酸水溶液，其他均为分析纯 乙醇溶液，蒸馏水。

主要实验仪器设备：Water Acquity H-Class UPLC超高效液相色谱(四元高压梯度泵，自动进样器，柱温箱，二极管阵列检测器以及Empower2数据处理工作站) 电子天平 真空干燥箱 旋蒸仪 电子天平 电热套 圆底烧瓶（1000ml 2000ml）球形冷凝管 水浴锅

研究计划与进度安排：

1.2015年2月—2014年3月

查阅有关文献资料，完成课题设计，撰写开题报告，做好实验前的准备工作；

2.2015年3月—2015年4月

完成各项实验，并对实验结果进行数据统计分析

3.2015年5月—2016年6月

整理资料，撰写论文，做PPT,准备答辩。

主要参考文献：　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　

[1] 姜辉, 刘健, 高家荣等. 五味温通除痹胶囊对类风湿关节炎风寒湿痹阻证模型大鼠的治疗作用[J]. 风湿病与关节炎, 2012, 1:23-27.

[2] 姜辉, 刘健, 孟楣等. UPLC法测定五味温通除痹胶囊中黄芩苷的含量[J]. 山西中医学院学报, 2014, (3).

[3] 林似波, 周婉玲. 桂枝茯苓丸临床运用的体会[J]. 广西中医药, 1983, (3).

[4] 胡英婕，承 伟. 高效液相色谱在中药有效成分含量测定中的应用[J]. 现代中西医结合杂志，2007，16（4）:556-557.

[5] 张玉婷, 高家荣, 刘健等. 正交试验法优选五味温通除痹胶囊水提工艺[J]. 安徽医药, 2014, (10). DOI:10.3969/j.issn.1009-6469.2014.10.006.

[6] 姜辉, 刘健, 高家荣等. 五味温通除痹胶囊对佐剂性关节炎大鼠细胞因子的调控作用[J]. 中药材, 2013, 36(11):1834-1836.