银杏叶,别名,飞蛾叶、鸭脚子,为银杏科植物银杏Ginkgo biloba L.的干燥叶。
银杏是我国的特产植物,占世界总量的70%,其叶片含有黄酮、萜内酯等多种有效成分,对于心脑血管、肿瘤、衰老等疾病的治疗和预防具有重要意义[1]。
银杏叶提取物主要的活性物质基础为黄酮类化合物(质量分数高于 24%)以及萜内酯类成分(质量分数高于 6%),微量的银杏酸类物质为其毒性限量物质(低于10 ppm),常见的银杏酸有 5种为氢化白果酸、白果新酸、白果酸、十七烷一烯银杏酸以及十七烷二烯银杏酸[2-4]。
黄酮类和萜内酯等多种活性成分的混合物,具有抗氧化和清除自由基、抑制由缺血引起的神经细胞凋亡、抑制和消除beta;淀粉样蛋白(beta;-amyloid)的聚积、影响神经递质转运等功能,临床上已广泛应用于治疗中风、记忆力减退、痴呆以及其他动脉闭塞性疾病[5],而备受关注,但是其中,银杏酸作为银杏叶提取物中的毒性成分,具有致敏性、胎盘毒性和免疫毒性作用[6-8] ,对人类的健康有潜在的危害。
因此不论是对黄铜、萜内脂等有益成分的测定还是对银杏酸的含量测定都显得尤为重要。
方法:建立UPLC-MS/MS测定银杏叶提取物主要活性物的含量以及质量提高。
采用超高效液相串联三重四级杆质谱法(UPLC-MS/MS),同时测定银杏叶提取物中19个有效物质的含量,包括10个黄酮,4个萜内酯以及5个银杏酸。
色谱条件,采用色谱柱:ACQUITYTM UPLC BEH C18 (1.7 mu;m, 2.150 mm),流动相: 0.1%甲酸水溶液(A)以及乙腈(B)粉,梯度洗脱(05 min,9070% A;58 min,7050% A),流速 0.3 mLmin-1,柱温30℃,进样量1微升。
采用的质谱条件:离子源温度:150℃;碰撞气流量:0.15 mL/min;多反应检测(MRM);锥孔气流量:50 L/h;脱溶剂气流量:1000 L/h;脱溶剂气温度:550℃;毛细管电压:3.0 kV 。
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