人体外Tfh诱导分化方法影响因素的研究文献综述

 2022-12-12 19:56:29

开题报告内容:(包括拟研究或解决的问题、采用的研究手段及文献综述,不少于2000字)

  1. 课题的研究背景、意义和目的

T细胞是淋巴细胞的主要成员,具有多种生物学功能,在机体抵御病原菌入侵和维持内环境稳定中具有重要作用。T淋巴细胞据其功表型可分为多种类型,其中CD4 辅助性T细胞可分化为Th1、Th2、Th17等不同亚群,在机体免疫应答中发挥不同的功能。滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells, Tfh)被划分为Th细胞的一个新亚群。Tfh细胞特征性标记为CXCR5 , PD-1 ,ICOS ,CCR7。同时,表达转录因子Bcl-6,使得滤泡辅助性T细胞不同于Th1和Th2亚群而形成一个新的T细胞亚群,是真正负责辅助B细胞的T细胞亚群。

Tfh在B细胞的发育、抗体形成、抗体类别转换,分泌高亲和力抗体,为机体清除外来病原体,建立长期体液免疫等过程中扮演主要角色。Tfh最早在人扁桃体中发现,被描述为一类表达趋化因子受体CXCR5的CD4 T细胞,趋化因子受体CXCR5,可趋化至外周淋巴组织滤泡中辅助B细胞体液免疫。起初Tfh发现于淋巴组织B细胞区,在记忆性B细胞和长寿命浆细胞的形成中发挥重要作用。但随着对Tfh细胞的研究,发现除滤泡中的Tfh细胞之外,在人外周血中也可检测到CXCR5 CD4 T细胞,这些细胞通过分泌IL-21,辅助B细胞的分化。

本课题在课题组前期分离好的PBMC中分离得到的淋巴细胞的基础上,进行Tfh细胞分化条件的摸索与条件优化。实验对各种细胞因子等分化条件进行比较,通过流式细胞术的方法,对分化的Tfh细胞中的荧光强度进行检测,以确定最优的Tfh分化条件。

  1. 课题研究的主要内容

1.从人血中提取PBMC,通过磁珠分选得到Naive CD4 T细胞。

2.研究IL-6、IL-12、IL-23、TGF-beta;因子对诱导Naive CD4 T细胞向Tfh细胞分化的影响。

3.通过流式细胞术检测Tfh细胞的分化情况。

  1. 研究难点

1.Tfh细胞分化条件的确立和优化方法

2.流式细胞术的操作及数据的处理分析

  1. 进度安排

2017.3-2017.4 查阅文献,了解实验背景,确定实验具体内容,实验相关物品的准备

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