研究目的：
探究FXR（farnesoid X receptor，法尼醇X受体）激动剂在治疗慢性肝性疾病中的应用和作用机制；探讨具有双重效应的FXR调节剂；FXR激动剂合并SUMO抑制剂的设计合成与药物筛选，进而通过细胞模型确认维持FXR功能在NASH中的治疗作用
研究意义：
FXR是一种代谢核受体，是一种主要的胆汁酸感受器，高度表达于肝细胞和肠细胞中，可通过相应靶基因参与多种代谢通路调节，在胆汁酸代谢中发挥重要作用，是当前作为治疗胆汁酸代谢紊乱相关疾病的新型药物靶点。SUMO（small ubiquitin-like modifier，小泛素样修饰剂）修饰是发生在细胞内的具有调节蛋白质稳定性、核-质转运、转录过程、有丝分裂和DNA损伤修复等细胞内过程的一种蛋白质翻译后修饰（PTM，protein post-translational modification），这种机制被认为与很多疾病的发生具有密切联系,而当FXR发生SUMO修饰时会抑制其目标基因的转录活性，在考察 FXR 的翻译后修饰进程之后发现，HSC 细胞活化过程中 FXR 蛋白的 SUMO 化水平逐步升高，而 SUMO 化修饰是一类被报道可以显著干扰转录活性的翻译后修饰手段，促使胆汁酸代谢转运异常的发生和肝脂肪积聚，并与炎性基因的调控有关，还会促进伴有肝细胞凋亡的HSC细胞活化，也就是肝纤维化的病理标志之一。NASH，全称nonalcoholic steatohepatitis，非酒精性脂肪性肝炎，是NAFLD (nonalchoholic fatty liver disease)，即非酒精性脂肪性肝病的一种较为严重的病理状态，伴随严重的肝脂肪淤积和变性以及一系列代谢异常，其发病机理被认为与胆汁酸代谢和转运异常有关。因此，本课题通过研究FXR作为药物靶点在治疗慢性肝疾病尤其是NASH中的作用和相关药物的药理作用机制，寻找合适的FXR激动剂与SUMO抑制剂联合进行药物筛选和临床用药设计，完成药物的初步活性评价，为临床对治疗NASH的合理用药和新药研发提供参考性意见。本研究中选用的FXR激动剂为奥贝胆酸（Obeticholic acid，OCA)，是首个FDA和EMEA批准的用于治疗原发性胆管炎、原发性胆汁性肝硬化和非酒精性脂肪肝的新型候选药物，临床证明可有效治疗和缓解肝纤维化。其机制主要是通过激动法尼醇X受体，调节相关基因，影响胆汁酸的合成、分泌、转运和吸收；应用的SUMO抑制剂为SP，可显著抑制HSC细胞活化过程中FXR蛋白的SUMO化水平。
研究手段：
- 动物实验
本实验通过建造CCl4和LPS诱导的肝纤维化动物模型然后进行给药探究OCA以及SUMO抑制剂对治疗肝纤维化和急性肝损伤的药理作用。
- 肝纤维化疾病模型：通过给随机分组的小鼠注射CCl4构造肝纤维化疾病模型，小鼠被随机分为四组，包括对照组、模型组和实验组，对照组小鼠不做任何处理，模型组和实验组小鼠腹腔注射20%的CCl4或矿物油每周两次持续六周，实验组1从第三周开始每天口服OCA的0.5％羧甲基纤维素钠混悬液，实验组2注射同等浓度的溶媒；
- 伴有肝细胞凋亡的急性肝损伤模型：小鼠通过随机分组方法被分为四组，包括对照组、模型组和实验组，对照组小鼠不做任何处理，模型组和实验组小鼠腹腔注射D-半乳糖胺和脂多糖（LPS）处理6小时，实验组1小鼠提前五天每天一次连续给药OCA，实验组2小组以相同方式给药OCA SP；
- 结果分析
① 血清谷丙转氨酶（ALT），谷草转氨酶（AST）浓度测定
应用自动血生化分析仪测定各小鼠的血清ALT和AST水平。若实验组中ALT和AST水平相比模型组均显著降低，则证明OCA和SP具有良好的肝保护作用；并通过ALT/AST比值来判断对肝炎是否有缓解作用；
② 血清总胆汁酸（TBL）,总胆红素（TBIL）测定
应用酶比色法测定小鼠血清TBL和TBIL的浓度。若实验组小鼠的血清TBL和TBIL浓度相比模型组显著降低，则证明OCA和SP具有较好的逆转急性肝损伤的作用；
