一、研究的主要目的及意义随着科研技术水平的不断提高，基因敲除（编辑）技术从载体构建到细胞的筛选再到动物模型的建立等各方面都得到了飞速发展。
其中Cre-LoxP系统可以有效的控制打靶的发育阶段和组织类型,实现特定基因在特定时间和(或)空间的表达删除及功能研究，因其在条件性基因敲除小鼠中获得的良好实验效果，得到了许多研究者的青睐，现已有多篇相关文献的成功报道。
丙酮酸激酶（Pyruvate kinase, PK）是糖酵解最后一步反应的关键限速酶，催化磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）和ADP转化为丙酮酸和ATP。
PK有四种同工酶，分别为M1型丙酮酸激酶（PKM1）、M2型丙酮酸激酶（PKM2）、L型丙酮酸激酶（PKL）和R型丙酮酸激酶（PKR），每种异构酶都具有独特的组织表达模式和调节性质。
PKL主要在心脏和肾脏中表达，PKR仅在红细胞中发现，它们都是由PKLR基因编码。
PKM1和PKM2均由PKM基因经选择性剪接形成，仅仅相差一个外显子，但是二者的功能却完全不同。
PKM1通常在成熟的组织中高表达，以四聚体形式存在且具有很高的丙酮酸激酶活性。
PKM2主要在胚胎和肿瘤等增殖旺盛的细胞中表达，存在四聚体和二聚体两种形式，四聚体形式的PKM2具有高丙酮酸激酶活性，催化丙酮酸的产生。
二聚体形式的PKM2仅有较低的丙酮酸激酶活性，主要以非经典的蛋白激酶的形式参与多条信号通路的调节。
两种活性的转换为处在不同环境的细胞提供生长优势和对微环境的适应能力［1-2］。
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