一、研究目的
疫苗接种室预防动物传染病的一种有效手段，但在实际使用过程中，免疫效果受到多重因素的影响，诸如抗原类型、免疫佐剂、抗原剂量、免疫途径和程序、母源抗体水平、个体差异和饲养管理等因素。每个单一因素或多重因素均直接或间接影响着疫苗免疫效果的研究。
目前对影响兽用疫苗效果的研究多集中在抗原类型、免疫佐剂等方面，而对抗原剂量、免疫途径等易被忽视。在研究有效抗原剂量方面，人用疫苗已有较多报道，特别是针对流感疫苗：抗原量过低不足以产生有效的抗体水平，过高则会造成机体免疫耐受，不但达不到免疫效果还会造成生产成本的增加。事实上，抗原剂量的高低不仅影响着机体的抗体水平，还影响着抗体亲和力以及免疫反应类型。因此，一种疫苗合适抗原剂量的确定对疫苗效果的发挥起着重要作用。本实验以gc、gd为抗原，用不同佐剂吸附后制备不同浓度的亚单位疫苗，免疫BALB/C小鼠，以elasa检测血清中抗体水平、抗体的相对亲和力指数，来探究gC2、gD1、gD2、各蛋白最佳免疫剂量、佐剂使用及免疫方案。
二、研究手段
将重组gC2、gD1、gD2分别用氢氧化铝吸附后，制备成不同浓度的亚单位疫苗，以100、50、20、10、5和1mu;g/只的剂量免疫BALBA/C小鼠，共免疫三次。于初次免疫后第14、28、42、56天眼眶取血，分离血清，采用间接ELISA法检测小鼠血清中特异性IgC抗体水平和特异性IgC1/IgC2比率。
1、材料与方法：
1.1实验动物 BALBA/C小鼠，雌性，50只，体重20-22g，购自斯莱克景达实验动物有限公司，动物合格证号：4304701548.
1.2抗原 gC2、gD1、gD2
1.3主要试剂 氢氧化铝凝胶（AHG-34--715L）购自丹麦InvivoGen公司；HRP标记的山羊抗鼠IgC（SI-A4416）购自美国Sigma公司；HRP标记的免抗鼠IgC1、IgC2a（610-4341）购自英国Rockland公司；其他试剂均为国产分析纯试剂。
1.4动物分组及免疫 将BSA和LTB-VP1蛋白分别用氢氧化铝（终浓度为1mg/ml）吸附，制备成不同浓度的亚单疫苗，用生理盐水稀释至1mg/ml。将50只小鼠随机分为10组，每组5只，皮下免疫小鼠，免疫剂量分别为100、 50、 20、 10、 5和1mu;g/只，初次免疫后14、 28天各加强免疫一次，免疫剂量为100mu;g/只。于初次免疫后第14、 28、 42、 56天眼眶采血，分离血清，置-20℃保存。
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