集藻胞Synechocystis sp. PCC 6803来源Cas3蛋白的表达纯化及结晶条件筛选一、研究背景在长期的共同进化过程中,原核生物与其病毒性捕食者演化出多种复杂的侵袭与防御策略。
主要的防御措施有抑制噬菌体吸附、打断侵入过程和外源核酸物质的降解。
这其中最令人兴奋的发现是被称为CRISPR/Cas系统的一种细菌的具有适应性和遗传性的获得性免疫系统。
CRISPR/Cas系统广泛存在于约50%的古细菌和90%的细菌用,主要用于抵抗外源性核酸物质如噬菌体DNA和质粒DNA的入侵。
完整的CRISPR基因位点包含富含AT的前导序列(Leader),在上游的前导序列被认为是CRISPR序列的启动子。
最后是CRISPR序列,是由众多短而保守的重复序列区(Repeats)和间隔区(Spacers)组成。
CRISPR重复序列含有回文序列,可以形成发卡结构,其的大小通常在28到37个碱基对(bps)之间,尽管可能只有23个碱基对,多达55个碱基对。
一些显示二元对称性,暗示在RNA中形成二级结构,例如茎环(发夹)结构,而其他结构设计为非结构化的。
不同CRISPR阵列中间隔区的大小通常为32至38bp(范围21至72bp)。
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